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【海能實(shí)驗(yàn)室】膳食纖維測定儀測定可溶性,、不可溶性及總膳食纖維含量
在追求健康生活的今天,，大豆及豆制品
因其豐富的營養(yǎng)價(jià)值和多樣的烹飪方式
逐漸成為人們的選擇。
大豆膳食纖維粉
是一種常見的食品原料,，
含有豐富的
可溶性和不可溶性膳食纖維,，
還含有豐富的氨基酸和少量植物脂肪。
測定大豆膳食纖維粉的膳食纖維含量
對于其質(zhì)量把控,、食效分類
具有重要意義,。
本方案使用DF06膳食纖維測定儀
對大豆膳食纖維粉進(jìn)行測定。
實(shí)驗(yàn)方案
儀器
DF06膳食纖維測定儀
K1100全自動(dòng)凱氏定氮儀
馬弗爐
分析天平
……
儀器準(zhǔn)備
1,、將濾膜編號,，于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MG后，安裝于過濾漏斗中,，并安裝至儀器相應(yīng)位置處,。
2、移取350 μLl的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液,，溶于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中,；移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液，溶于盛有47 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中,；移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液,，溶解于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中，然后將酶瓶安裝至儀器相應(yīng)位置處,。
3,、將酶解袋裝于儀器相應(yīng)位置處。
4,、確保95%乙醇,、純水、順丁烯二酸緩沖液,、醋酸溶液的對應(yīng)試劑桶中試劑充足,，然后將其與對應(yīng)接頭連接。
樣品制備
本方案采用SOX606索氏提取儀進(jìn)行樣品的脫脂處理,。
精確稱取混勻后的樣品10~12 g（精確至0.1 mg）左右,，記為MC。將稱好的樣品轉(zhuǎn)移至濾紙筒中,。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內(nèi),，向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚,，儀器參數(shù)設(shè)置如下：
抽提完成后，將殘?jiān)娓芍梁阒?，記為mD,。
總膳食纖維測定
1、設(shè)定酶解程序如下：
2,、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序,，開始運(yùn)行，并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對應(yīng)位置處,，然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中,。（注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知，否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋,，沖洗體積不超過兩毫升）,。
3、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解,、乙酸溶液添加,。然后根據(jù)彈窗提示測定（或需添加1 mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白、樣品的pH值為4.3±0.2,，然后點(diǎn)擊下一步,。若需測定不可沉降性膳食纖維（SDFS），則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物,，以進(jìn)行后續(xù)的液相法測試,。
4、儀器自動(dòng)進(jìn)行沉淀,、抽濾,，得到濾液與TDF的殘?jiān)瑢⒏接袣堅(jiān)臑V紙取出,，按照十字折疊后放置于樣品架上,，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR。
5,、每兩份殘?jiān)?，一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》第一法進(jìn)行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g,、硫酸20 mL，420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)）,，蒸餾,、滴定，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP,；另一份置于馬弗爐中,，于550℃下灰化3h測定灰分,，計(jì)算灰分質(zhì)量MA。
不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測定
1,、設(shè)定酶解程序如下：
2,、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序，開始運(yùn)行,，并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對應(yīng)位置處,，然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。（注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知,，否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋,，沖洗體積不超過兩毫升）。
3,、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解,、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測定（或需添加1mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白,、樣品的pH值為4.3±0.2,，然后點(diǎn)擊下一步。若需測定不可沉降性膳食纖維（SDFS）,，則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物,，以進(jìn)行后續(xù)的液相法測試。
4,、儀器自動(dòng)進(jìn)行抽濾,，得到濾液與ISDF的殘?jiān)瑢⒏接袣堅(jiān)臑V紙取出,，按照十字折疊后放置于樣品架上,，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR。
5,、將過濾漏斗的外斗裝回儀器對應(yīng)位置,，點(diǎn)擊下一步，儀器自動(dòng)加入95%乙醇進(jìn)行沉淀,。
6,、沉淀完成后，在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶,，將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾,。抽濾完成后，按照十字折疊后放置于樣品架上,，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR,。
7、每兩份殘?jiān)?，一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》第一法進(jìn)行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g,、硫酸鉀3 g,、硫酸20 mL，420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)）,，蒸餾,、滴定，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP,；另一份置于馬弗爐中,，于550℃下灰化3h測定灰分，計(jì)算灰分質(zhì)量MA,。
結(jié)果,、討論與注意事項(xiàng)
1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)選取的大豆膳食纖維粉樣品經(jīng)酶解,、抽濾,、烘干恒重、測定蛋白和灰分后,，得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示,，其中不可溶性膳食纖維（ISDF）的結(jié)果如下：
可溶性膳食纖維（SDF）含量如下表：
總膳食纖維（TDF）為ISDF與SDF的加和,，測得該大豆膳食纖維粉的總膳食纖維含量為71.090%,。
3、注意事項(xiàng)
大豆膳食纖維粉可部分殘留于稱量紙上,，必要時(shí)可用不超過2 mL緩沖溶液沖洗,，洗液一并轉(zhuǎn)移至酶解袋中。
隨著人們越來越注重飲食健康,，更多人關(guān)注到膳食纖維這一指標(biāo),。根據(jù)《中國居民膳食指南》要求，每日需攝入25-30g 膳食纖維,，在日常選購商品時(shí),，大家也可關(guān)注“增加膳食纖維”等標(biāo)注。
自動(dòng)膳食纖維測定儀可一鍵化完成酶解,、沉降,、洗滌等過程，以自動(dòng)化操作替代繁瑣人工,，有效提高實(shí)驗(yàn)效率,。DF06膳食纖維測定儀高效自動(dòng)、精準(zhǔn)可靠,、簡便友好,、安全合規(guī)，主要應(yīng)用于食品中總膳食纖維,、可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維等指標(biāo)的檢測,。